环介导恒温扩增针对靶基因上的六个区域设计四条引物,利用链置型DNA聚合酶在恒温(60-65℃)条件下进行扩增反应,可在15-60分钟内实现109-1010倍的扩增,具有简单、快速、特异性强的特点。


项目分类:
LAMP-PCR
RT-LAMP-PCR

荧光染料:
SYBR Green是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光。在PCR反应过程中,随着循环的增加,双链DNA量增加,相应的SYBR Green荧光值增加,由此指示PCR反应运行过程。


UNG酶防污染:
UNG酶能选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键, PCR实验中最重要的污染物是PCR产物,为防止污染,以dUTP代替常规PCR反应体系中的dTTP,生成含有dUTP的DNA扩增产物,在下一PCR开始前增加50℃的保温步骤,UNG酶即可将反应体系中已有的U-DNA污染物降解,从而保证扩增结果的特异性,准确性,随后UNG酶在变性温度下被灭活。

优势:
1、快速、高效。不需要预先的双链 DNA 的热变性,避免了温度循环而造成的时间损失。
2、高灵敏度,与 PCR 相比高出几个数量级。
3、高特异性。 针对靶序列的 6 个区域设计的 4 种 特异性引物,6 个区域中如有一处与引物不匹配均不能进行核酸扩增。
4、操作简单,并不需要昂贵的仪器,要求简单,可操作性强。

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